阴道栓是雄性大、小鼠交配后,精液和雌性阴道分泌物混合,在雌鼠阴道内凝结而成白色稍透明、圆锥形的栓状物,一般交配后2~4小时即可在雌鼠阴道口形成,并可在阴道停留12~24小时。
小鼠的阴栓比较牢固,可在阴道内存留1~2天;大鼠的阴栓不牢固,容易脱落。所以,检查大鼠的阴栓时,除检查阴道外,还应在笼底寻找阴栓。出现阴栓说明已经交配。(附阴道栓图片)
如果动物房光线比较明亮,白天不需要开灯。请注意,检查阴栓,一定要起早检查,你也可以晚上合笼迟一点,比如7点半合笼,早上7点检查。
大鼠受孕的检测方法:昼夜控光大鼠在某日下午合笼后,次日上午进行阴道涂片,用相差显微镜10倍或20倍的物镜观察,受孕者精子一般较多且密集(当然也和涂片手法有关,通常可以在载片上多涂几下),精子头部为弯镰刀头状,尾部很长,或直或折曲。因为一般发情期大鼠才能合笼成功,所以涂片时若发现有白色凝块(为此期阴道中特征性的大量无核角化细胞形成)者,一般都会受孕。以涂片见精子判断为妊娠第一天。
1.关于SD大鼠的选择
性成熟期约为8周,体重240-280g左右(雌250g,雄300g)
最适交配时间:雄鼠,90日龄,约400g;雌鼠,80日龄,约300g
理论上性成熟后交配没有问题,但是考虑到成功率的高低,建议在最适时间交配。 尤其有资料指出雌鼠的体重过轻容易影响胎鼠的质量。有的实验室雌鼠体重偏轻,约200-250g,但是受孕过程也很顺利,胎鼠也没有明显异常。
2.关于受孕前后的饲养
饲料:除常规大鼠饲料外,可添加瓜子和鸡蛋。瓜子是生的葵瓜子,不用去壳,它们很会剥;鸡蛋是白煮,老鼠尤其爱吃蛋黄。饮水中可添加维生素E。
合笼:傍晚合笼,次晨分笼,检查是否交配。
3.关于检查受孕与否的方式
1)有资料说雌鼠的阴道口随动情周期有所变化,但一般人难以分辨;
2)检查阴栓有很多人提到过,不过如果检查的时间迟了点,阴栓极有可能已脱落,如果是有底铺垫料的鼠笼,估计也没人能找到脱落的阴栓。
3)阴道涂片,我想是最实用,成功率最高的了。
a.动情间期/静止期
大部分为白细胞,混有少量较小的有核扁平上皮细胞
b.动情间期向动情前期发展
膨大的椭圆形的有核上皮细胞逐渐出现,增多
典型大鼠发情各阶段的阴道组织涂片:发情前期阴道涂片的特征为椭圆形的有核上皮细胞占绝大多数,白细胞和角质化上皮细胞很少;发情期阴道涂片的特征为片状的,角质化上皮细胞占绝大多数,白细胞和有核上皮细胞很少;发情后期阴道涂片的特征为片状角质化上皮细胞、有核上皮细胞和白细胞3种细胞都有,并且比例无明显差异;发情间期阴道涂片的特征为白细胞占绝大多数,有核上皮和角质化上皮细胞很少。